福尔马林消毒微生物挑战性试验消毒条件：相对湿度为7090；温度为24一40℃。将枯草芽胞杆菌制成菌片，菌数每片不少于10个，将菌片放入经灭菌的平皿，每个平皿放三片，根据房间体积，按30ml/n13的用量计算福尔马林的用量。

装有菌片的平皿布点按有关规定执行，并做好标记。打开平皿，将福尔马林倒入加热盘中，密闭门窗，然后加热使其蒸发成气体。灭菌流程：风机停止运转一在加热盘中加热福尔马林让福尔马林气体扩散（约3Omin）房间熏蒸消毒（12h）一25氨水加热（8一10ml/m）约15min以中和剩余的气体房间排气，用新鲜空气换置（约Zh）恢复正常运行。

灭菌结束后，回收菌片放入营养肉汤培养基中，在37℃下培养3天，应无细菌生长。沉降菌检测与棉球擦抹法试验：丙二醇和福尔马林熏蒸消毒后均应做沉降菌检测与棉球擦抹法试验。沉降菌测定：用gcm双碟暴露30min，沉降菌平均菌落数应镇杀菌率一消毒前菌数一消毒后菌数消毒前菌数X100.手部消毒：操作人员进入洁净室前先用肥皂洗手、腕、肘，并用洗手刷刷指甲，把手晾干。

进入洁净室的外缓冲间，先用0.1的新洁尔灭（2来苏儿）浸泡双手smin，用消毒毛巾擦净，再用75酒精浸泡双手smin，用消毒毛巾擦净。打开营养琼脂平皿，先将手的中间三个手指按在琼脂板上，然后按小指，再按大拇指，五个手指在一个平皿内不能重合，左右手各做两个平皿。将平皿放入37℃温箱培养48h，左右手各两个平皿均无细菌生长为合格。

气体熏蒸消毒丙二醇熏蒸微生物挑战性试验消毒条件：温度为20一25℃；相对湿度为5065.将枯草芽胞杆菌制成菌片，菌数每片不少于10个，将菌片放入经灭菌的平皿，每个平皿放三片。根据房间体积按1.sml/m计算丙二醇的用量。装有菌片的平皿布点按有关规定执行，并做好标记。

打开平皿，将丙二醇倒入加热盘中，另加适量水混匀，密闭门窗，然后加热使其蒸发成气体。灭菌流程为：风机停止运转在加热盘中加热丙二醇让丙二醇气体扩散（约30min）房间熏蒸消毒，时间10h房间排气，棉球擦抹法试验：方法及判定结果同1

验证结果表面擦拭消毒效果：0.25新洁尔灭和75的酒精三次试验的杀菌率。6、94、95.3，均大于90，符合要求。2来苏儿和75的酒精三次试验的杀菌率分别为97.、96.5、94.6，均大于90，符合要求。

手部消毒效果：左右手各两个平皿均无细菌生长，符合要求。丙二醇熏蒸消毒效果：丙二醇熏蒸无菌间后，两次试验所有平皿均无细菌生长，符合要求。福尔马林熏蒸消毒效果：福尔马林熏蒸无菌间后，两次试验所有平皿均无细菌生长，符合要求。沉积沉降菌检测与棉球擦抹法试验沉降菌检测：福尔马林和丙二醇两次试验平均菌落数均<1，符合要求。

棉球擦抹法试验：丙二醇两次试验的杀菌率分别为9.2、99.4，福尔马林杀菌率分别为9.5、9.6，均符合要求讨论在进行消毒灭菌时，0.25（0.1）的新洁尔灭和2的来苏儿应轮换使用，丙二醇和甲醛也应轮换使用，以防产生微生物耐药菌株。其更换周期也应进行消毒效果验证。